编者按
HPV的检测在宫颈癌的早期筛查中扮演着重要的角色，很大程度上提升了宫颈癌和癌前病变的检出率。HPV的检测方法最初是基于细胞学检查所见，随着人们对HPV和宫颈病变关系的深入了解，HPV-DNA/RNA检测在宫颈病变预防、筛查、诊治及随访中的作用日益显现，优于传统的细胞学检查。本文将简要介绍现有的部分HPV检测方法。
一、 细胞学检查
在传统的巴氏涂片法中，巴氏染色可发现由HPV感染导致原由网的特征性“挖空细胞”。其优点包括：诊断特异性高，便宜，原由网便于普查；缺点在于：低准确率，低灵敏度和低重复性，主观性强，高假阴性率，不能分型，存在一定的误诊、漏诊率。为确定是否有HPV感染还需用特异性抗HPV抗体，作组织化学染色或采用原位杂交技术。
近年来，改良的细胞学制样技术——薄层液基细胞学检查(TCT)逐渐打破了巴氏涂片法的垄断局面。薄层液基细胞学检查是用特制的毛刷收集宫颈口及颈管的脱落上皮细胞，然后将采集器前端放入装有细胞保存液的小瓶中漂洗，细胞被直接收集到含有甲醇的保存液中，然后经全自动制片机进行制片。
二、 HPV DNA检查
1. 杂交捕获2代技术（HC-Ⅱ）
HC-II本质上是基因杂交信号放大技术，采用分子杂交和化学发光信号放大的原理，无需基因扩增，属于线性级数放www.58yuanyou.com大。其原理见下图。
1为样本DNA双链被释放并分解为核苷酸单链；2为DNA单链与RNA探针结合为DNA/RNA杂交体；3为第1抗体将DNA/RNA杂交体固定在试管壁或微孔壁上；4为结合有碱性磷酸酶的多个第2抗体与DNA/RNA杂交体结合，使信号放大；5为碱性磷酸酶使底物发光，判读光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量，从而确定DNA/RNA的含量。
2. 实时荧光定量PCR技术（Cobas 4800）
实时荧光定量PCR技术在常规PCR基础上加入荧光标记探针，从PCR扩增到得出结果是在完全封闭的系统中运行原由网，无需PCR后处理，从而避免了扩增产物污染和交叉污染的可能性。
该技术在DNA扩增时结合了特异探针的杂www.58yuanyou.com交，进一步提高了实验的敏感性和特异性。它可以实时利用荧光监测DNA扩增过程，使结果准确可靠，非常适合用于临床的大面积筛查。
3. 酶切信号放大法（Cervista HPV）
Cervister HR HPV DNA检测采用的是Invader专利技术，由Cleavase酶特异性识别并切割目标DNA分子结构，通过识别目标DNA与信号放大两个步骤，直接检测特定核苷酸序列，无需进行基因扩增。
4. 基因芯片法
基因芯片法是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样本杂交，通过对杂交信号的检测分析，得出样本的遗传信息(基因序列和表达信息) 。
三、HPV RNA检查
逆转录扩增法（Aptima-mRNA）
Aptima HPV是基于E6、E7mRNA的新一代HPV检测技术，能直接检测出基于HPV的2个致癌基因E6、E7mRNA，降低了传统HPV DNA检测对于一过性HPV感染的检出率，识别出真正有癌变风险的HPV感染。Aptima HPV技术是获得美国FDA批准的第一个HPV mRNA检测技术，该技术于2012年正式获批并开始投入使用。该技术有两种检测试剂盒，分别是Aptima HPV（AHPV）和Aptima HPV16/18/45 Genotype（AHPV GT），后者能对前者阳性结果进行分型检测。
参考文献
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[4] 朱趁芬, 段仙芝. 宫颈癌筛查采用Cervista与HC2法比较的研究进展. 内蒙古医学杂志, 2014(01): 46-48.
撰稿 | 刘志福
编辑 | 王璐
审核 | 陶霞 江路
