Hi，各位读者朋友下午好！每当大家带着崇拜之情阅读CNS文献的时候，看到那些高（wu）端（yan）大（liu）气（se）的图片是不是感觉科研之魂在熊熊燃烧呢？而各种各样的reporter鼠就是这些精美图片中不可或缺的一环。今天小编给大家带来的就是关于reporter鼠的科普知识。
所谓reporter鼠，就是敲入了报告基因（reporter gene）的鼠。常见的有TdTomato鼠、mT/mG鼠、LacZ鼠、彩虹鼠等，他们的重要作用是对各种特异性表达的Cre工具鼠进行验证，简而言之就是“工具鼠的工具鼠”：前面我们关于Cre-loxp系统的介绍中大家已经知道了带有特异性表达的Cre工具鼠，然而如何去验证这种鼠的特异性表达呢？前人们巧妙地设计了reporter鼠来指示Cre鼠的特异性。
B-tdTomatocKI大鼠
TdTomato大鼠（SD-Gt(ROSA26)tm1(CAG-LSL-Tdtomato)/Bcgen）在ROSA位点敲入了一个CAG启动子、TdTomato蛋白编码序列和WPRE序列，并在CAG启动子和TdTomato序列之间插入了LSL（loxp-3stop-loxp）序列。如图1所示。
图1. TdTomato的打靶策略[1]
这种鼠在正常情况下由于3stop的存在并不能表达红色荧光，当与Cre鼠或TAM激活的CreERT2鼠交配后，产生的后代由于Cre重组酶切割loxp位点之间的序列将3stop切除，TdTomato得到表达，就可以在Cre或CreERT2表达的组织中发出红色荧光，指示基因的位置。图2所示就是一种TdTomato cKI大鼠的实验结果：
图2. TdTomato大鼠与大脑特异表达Cre大鼠交配后子代的组织荧光实验[1]
图片中红色的部分就是鼠的大脑了，而那一抹醒目的红色就是大鼠的海马体啦，小伙伴们是不是觉得很酷炫呢？
mT/mG小鼠
mT/mG（ROSA-pCA-loxp-mT-pA-loxp-mG-pA）鼠的设计就更精妙了。这种鼠的组织被Cre重组前能够在膜上发出红色荧光，而被Cre重组后则在膜上发出绿色荧光。所以顾名思义，mT/mG的m意思就是membrane，T就是指TdTomato，而G含义是eGFP 。为了达到这种效果，在ROSA 位点敲入了pCA启动子、一段mT和pA序列、一段mG和pA序列，在mT和pA序列两端分别插入了 一段loxp位点，如图3。
图3. mT/mG 小鼠的打靶策略[2]
这种鼠在正常情况下表达定位在膜上的TdTomato荧光蛋白，mT序列后面的pA信号会将后面的序列转录过程强行终止。而经过Cre重组后mT+pA序列被切除，后面的mG蛋白得到表达。于是就得到了万红丛中一点绿的效果，如图4。这种神奇特点赋予了它一种特殊的作用：工具鼠的工具鼠，即验证各种特异性表达工具鼠的表达//www.58yuanyou.com位置。
图4. Cre重组后的小鼠组织[2]
R26R(LacZ)小鼠
R26R鼠（ROSA-LSL-LacZ）是通过pROSA26-1载体构建的一种reporter鼠，插入了一段LSL序列和LacZ序列，如图5A。这种鼠正常情况下并不表达LacZ，用LacZ的底物X-Gal对组织切片染色并不能显色；而被Cre重组后，由于LSL序列被敲除，LacZ表达，在小鼠的组织切片中用X-Gal染色就会发生蓝色的显色反应，如图5B。当然啦，由于LacZ鼠只能通过X-Gal显色，所以仅适用于体外检测。
图5. LacZ鼠打靶方案及体外检测显色[3]
R26R-Brainbow2.1小鼠
Brainbow小鼠Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-Brainbow2.1)Cle），顾名思义就是彩//www.58yuanyou.com虹一样的小老鼠。这种鼠的设计方案与前面的reporter鼠相比又高了一个层次。
Brainbow鼠利用了3种不同的lox序列：lox2272、loxN和loxpwww.58yuanyou.com。当遇到不同的Cre鼠切割的序列不同，能够发出的荧光也就不同。打靶方式如图6。
图6. Brainbow鼠的打靶策略[4]
是不是看着有点晕？其实道理还是很简单的啦，每一段带有发光集团的序列里还有一小段pA信号序列作为转录强制终止，只需要对应的Cre识别对应的lox位点就可以正确的发光啦，所以说幸福就是在对的时间遇到对的人。图7就是一种Brainbow鼠的幸福：通过上面的四种pEJPzx荧光集团发出了10种不同的颜色来指示不同基因启动子的表达位置。
图7. Brainbow鼠重组后的组织显色[4]
好啦，今天的科普分享就到这里啦，请大家多多关注百奥赛图，我们会给大家带来更多的科普知识，文献解读和优质模式动物，祝您科研顺利！
参考文献：
1.http://www.bbctg.com.cn/index/article/index/aid/504.html
2. Muzumdar M D, TasicB, Miyamichi K, et al. A globaldouble‐fluorescent Cre reporter mouse[J]. genesis, 2007,45(9): 593-605.www.58yuanyou.com
3. Soriano P. Generalized lacZexpression with the ROSA26 Cre reporter strain[J]. Nature genetics,1999, 21(1): 70.
4. Yanai H, Tanaka T, Ueno H. Multicolorlineage tracing methods and intestinal tumors[J]. Journal of gastroenterology,2013, 48(4): 423-433.
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